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細(xì)說兔elisa檢測試劑盒的原理、使用性能以及標(biāo)本

發(fā)布時間:2022-04-20   點(diǎn)擊次數(shù):1354次
  兔elisa檢測試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA法定量測定兔血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中兔ELISA試劑盒含量。
 
  兔elisa檢測試劑盒基本原理:
  1、抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
  2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
  3、酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。
 
  性能特點(diǎn):
  1、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900;
  2、靈敏度:最小檢測濃度小于;
  3、特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng);
  4、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%;
  5、貯藏:2-8℃,避光防潮保存;
  6、有效期:6個月。
 
  兔elisa檢測試劑盒液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
  2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
  3、尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
  4、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
  5、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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