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教你如何解決這些關于小鼠elisa檢測試劑盒的常見問題

發(fā)布時間:2021-08-23   點擊次數:1517次
  小鼠elisa檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
 
  實驗原理:                                     
  將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
 
  性能:
  1、特異性:不與其它細胞因子反應。
  2、重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
  3、靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
 
  小鼠elisa檢測試劑盒的常見問題解析:
  1、加樣量不一致?
  解決方法:樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
  2、樣品數量多少不一,加樣時間有長有短?
  解決方法:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與第1次接近。
  3、保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
  解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。
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