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看這兒,大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的使用方法和選購(gòu)常識(shí)介紹

發(fā)布時(shí)間:2018-10-26   點(diǎn)擊次數(shù):2482次
   看這兒,大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的使用方法和選購(gòu)常識(shí)介紹
  
  實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
  
  1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
  
  2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
  
  3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  
  4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  
  5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
  
  6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
  
  大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒選購(gòu)知識(shí):
  
  01.特異性
  
  大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對(duì)有關(guān),若抗體對(duì)中之一為多抗,另一個(gè)有必要為單抗,主張運(yùn)用雙單抗。
  
  02.活絡(luò)度
  
  大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒的活絡(luò)度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢目標(biāo)的量挑選適宜的試劑盒,假如待檢目標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可挑選高敏的elisa試劑盒。
  
  03.重復(fù)性
  
  科學(xué)試驗(yàn)講究重復(fù)性,一般大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。
  
  04.簡(jiǎn)便性
  
  大鼠ELISA檢測(cè)試劑盒在確保高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,試驗(yàn)時(shí)刻越短,操作越便當(dāng),越簡(jiǎn)單受到用戶歡迎!這也不妨作為挑選試劑盒的一個(gè)目標(biāo)。
  
  
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